液相色譜柱的使用
更新時(shí)間:2016-09-26 點(diǎn)擊次數(shù):1830
液相色譜柱的使用:
色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。但要留意:柱性能可能由于所使用的樣品、活動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測試所使用的條件是*條件),只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。
1、樣品的前處理:
a、使用活動相溶解樣品。
b、使用予處理柱除往樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。
c、使用0.45μm的過濾膜過濾除往微粒雜質(zhì)。
2、活動相的配制:
液相色譜是樣品組分在柱填料與活動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求活動相具備以下的特點(diǎn):
a、活動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時(shí)間保存在柱中)。
b、活動相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)。
c、活動相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時(shí)能得到好的分離效果;同時(shí)降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命(可運(yùn)用進(jìn)步溫度的方法降低活動相的黏度)。