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液相色譜柱使用維護(hù)心得,這次全給你!

更新時(shí)間:2019-07-30 點(diǎn)擊次數(shù):2944

 

液相色譜柱在使用過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題

 

液相色譜是一種的分析手段,液相色譜柱是色譜分析系統(tǒng)的“心臟”,由于被分析樣品種類(lèi)繁多,加之樣品基質(zhì)復(fù)雜,色譜柱極易被強(qiáng)保留物質(zhì)污染。這些強(qiáng)保留物質(zhì)通常難以洗脫,多次上樣后,聚集在柱頭端,堵塞篩板,甚至可能與填料發(fā)生相互作用導(dǎo)致填料變性,這會(huì)導(dǎo)致柱效下降,分離度降低和峰型異常等現(xiàn)象。因而液相色譜柱的維護(hù)是十分必要的。

 

        

正常的篩板                                                         堵塞的篩板

 

月旭科技液相色譜柱維護(hù)

 

液相色譜柱需要維護(hù),但是不同廠(chǎng)家的色譜柱維護(hù)方式各不相同。月旭科技液相色譜柱推薦正向使用,反向沖洗。因?yàn)樵滦竦纳V柱兩端用的篩板孔徑是一樣的,不會(huì)存在反沖時(shí)把填料沖出來(lái)的情況。當(dāng)做完樣品分析后,絕大部分污染物都富集于柱頭端,這個(gè)時(shí)候如果立即進(jìn)行反沖可以很大程度上延長(zhǎng)色譜柱填料壽命。

 

 

液相色譜柱如何反沖

 

液相色譜柱反沖時(shí)遵循的原則是用比流動(dòng)相洗脫能力更強(qiáng)的溶劑沖洗。

 

反相色譜柱(C18、C8)可以選擇極性較小的溶劑反向沖洗,推薦如下沖洗方法:

水→甲醇→乙腈→異丙醇→二氯甲烷→異丙醇→乙腈

 

正相色譜柱(SiO2, NH2,CN, DIOL)可以選擇極性較大的溶劑反向沖洗,沖洗方法如下:

正己烷→二氯甲烷→乙酸乙酯→異丙醇→乙腈→甲醇

 

如果流動(dòng)相中含有緩沖鹽,在運(yùn)行序列過(guò)程中出現(xiàn)柱壓異常升高的現(xiàn)象,則發(fā)生了緩沖鹽在色譜柱柱床上析出,推薦采用如下維護(hù)方法:

• 用甲醇/水=10/90以分析流速35℃柱溫反向沖洗色譜柱60個(gè)柱體積;

• 用甲醇/水=10/90以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過(guò)夜。

 

含緩沖鹽的流動(dòng)相正確使用方法:

 

 

例子:流動(dòng)相中有緩沖鹽,嘗試用10%甲醇 0.2ml/min反向沖洗一晚上后柱效恢復(fù)正常。

色譜柱:Ultimate XB-C18, 4.6×250mm,5μm。

波長(zhǎng)  :254nm;

流動(dòng)相:甲醇-水=75:25;

溫度  :25℃;

流速  :1.0ml/min;

進(jìn)樣量:20μL。

 

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