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想提高理論塔板數(shù)?來看看怎么解決!

更新時間:2020-07-01 點擊次數(shù):23715

今天給各位小伙伴們講講該如何有效的提高理論塔板數(shù)。理論塔板數(shù)也稱為柱效,是色譜分析中的一個重要參數(shù)。各位小伙伴經(jīng)常會看到藥典中規(guī)定理論塔板數(shù)不低于某一個數(shù)值,因為一旦色譜柱理論塔板數(shù)低于該數(shù)值,就會出現(xiàn)分離度或者拖尾因子達(dá)不到要求的情況,所以理論塔板數(shù)是我們衡量色譜柱是否還能用于該項目的一個很重要的參考依據(jù)。

 

 

理論塔板數(shù)是色譜柱性能的主要參數(shù),是表示色譜柱對樣品的分離能力或是分離效率(簡稱柱效),常用“N”表示。通常N值越大,柱效越高,分離能力越強,分離效果就越好。

如果色譜峰形對稱并符合正態(tài)分布,N可近似表示為:

 

 

N取決于色譜柱固定相(填料)的種類、性質(zhì)(粒度、粒徑分布等)、填充狀況、柱長、柱內(nèi)徑、流動相的種類、流速及測定柱效所用物質(zhì)的性質(zhì)。

 

 

理論塔板數(shù)可以定量柱效率,計算公式如下:

 

 

N的大小主要和色譜峰中的兩個因數(shù)有直接關(guān)系,一是保留時間(t單位秒(s)),二是色譜峰寬(w單位厘米(cm)),要想提高色譜峰的分離效果,增加理論塔板數(shù),我們只要從這兩個方面做起就足夠。

 

 

延長樣品保留時間方法很多:

1.選擇更長的色譜柱;

2.降低色譜柱溫度;

3.減小流速(這個盡量不要變,因為流速減小,色譜峰寬也會變寬,同時檢測靈敏度也會降低,這樣可能會得不償失);

4.適當(dāng)降低流動相中有機相的含量(主要針對反相色譜)。

 

 

 

減小色譜峰寬的方法也有很多:

1.減小進(jìn)樣量;

2.減小進(jìn)樣器到檢測池之間管路的死體積,尤其是縮短連接管路;

3.采用超高效液相色譜時,采用縮短保留時間的方法也能減小色譜峰寬(這樣可能對增加理論塔板數(shù)并無幫助)。

 

 

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