“相塌陷”來(lái)的是如此突然

更新時(shí)間：2021-12-27 點(diǎn)擊次數(shù)：1266

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在疏水作用色譜也就是反相色譜中經(jīng)常能聽(tīng)到的名詞，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的表現(xiàn)形式為，對(duì)物質(zhì)沒(méi)有保留，出峰時(shí)間靠前，使得峰之間沒(méi)有保留。

案例

色譜柱：Ultimate^® XB-C8 21.2×250mm，10μm。

流動(dòng)相：近似純水。

第一天

正?；罨M(jìn)樣色譜圖：

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晚上不進(jìn)樣，由于流動(dòng)相中沒(méi)有酸堿等添加劑，清洗自動(dòng)進(jìn)樣器后關(guān)機(jī)。

第二天

直接流動(dòng)相沖洗2倍柱體積進(jìn)樣色譜圖：

（中間已經(jīng)進(jìn)樣過(guò)30多針）

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一切正常，由于實(shí)現(xiàn)了色譜柱自由，樣品也足夠干凈，為了下周一過(guò)來(lái)能更快做實(shí)驗(yàn)，仍然清洗自動(dòng)進(jìn)樣器后關(guān)機(jī)。

周一

平衡2倍柱體積進(jìn)樣：

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出峰異常沒(méi)有峰，懷疑色譜柱沒(méi)有平衡好，畢竟過(guò)了周末，沖多洗一段時(shí)間，出峰正常，但是出峰提前了2分鐘幾個(gè)雜質(zhì)峰均為分離。

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排查原因：

1、流動(dòng)相是否弄錯(cuò)了；

2、儀器參數(shù)設(shè)置是否正常；

3、儀器實(shí)際流速是否正常。

均正常后，懷疑色譜柱相塌陷，雖然C8的極性較強(qiáng)，耐受高比例的水甚至純水，但是畢竟在近純水的環(huán)境中浸泡了48小時(shí)，80%乙腈水沖洗5倍柱體積，再進(jìn)樣正常。

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知識(shí)點(diǎn)：反相色譜固定相。

例如：C18，C8，PHEYNL等耐受高比例的水甚至是純水，其實(shí)是指在這樣的流動(dòng)相體系中不發(fā)生相塌陷，保留時(shí)間峰面積等都穩(wěn)定，不影響日常檢測(cè)。

在這個(gè)案例中，C8鍵合相在長(zhǎng)時(shí)間浸泡在近純水的體系中仍然出現(xiàn)了相塌陷，因此，在較長(zhǎng)時(shí)間不使用時(shí)還是需要用較高比例的有機(jī)溶劑水進(jìn)行沖洗保持。

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